產(chǎn)品及特點：
1. 即開即用，用戶只需要提供DNA模板。
2. 引物經(jīng)過精心優(yōu)化，專一性強，只擴增豎琴奧斯特線蟲，與其他病原沒有交叉反應(yīng)。
3. 提供陽性對照，便于區(qū)分假陰性樣品。
4. PCR mix 中含上樣染料，PCR后可以直接上樣電泳。
5. 本試劑盒足夠做40μL體系的PCR 50次，但只能用于科研。
規(guī)格及成分：
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編號
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成分
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規(guī)格
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試劑一
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PCR MagicMix 3.0
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1 mL（紅蓋）
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試劑二
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超純水
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1 mL（亮黃色）
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試劑三
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豎琴奧斯特線蟲 PCR 引物混合液
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100 μL（白蓋）
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試劑四
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豎琴奧斯特線蟲 PCR 陽性對照（1×10E8 /μL）
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50 μL（黃蓋）
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試劑五
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使用手冊
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1 份
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運輸及保存：
低溫運輸，-20℃保存，保存期限為一年。陽性對照需要單獨放置，不要污染其他試劑。
自備試劑：
樣品 DNA。
豎琴奧斯特線蟲PCR試劑盒
使用方法：
一、樣品 DNA 的制備：
1. 用自選方法純化N+2個樣品的DNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù)核酸提取試劑盒兼容?？梢赃x用本公司柱式病毒 DNAout。
2. 如果有N個樣品，則需要做N+2個提取，包括一個樣品制備陽性對照和一個樣品制備陰性對照。樣品制備陽性對照是在適量水（取決于試劑盒要求的樣品起始量）中加 10μL 豎琴奧斯特線蟲 PCR 陽性對照的 1000 倍稀釋液而得，樣品制備陰性對照是直接用水。提取結(jié)束后得到模板 DNA 放冰上待用。
二、設(shè)置 PCR 反應(yīng)（40μL 體系）：
3. 對N+2個樣品，在PCR時需要增加一個PCR陽性對照和一個PCR陰性對照，故需要設(shè)置N+4個反應(yīng)。在N+4個PCR管中分別加入下列成分：
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成份
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N+2 個樣品管
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PCR 陰性對照
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PCR陽性對照
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PCR Magic Mix 3.0
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各 20μL
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20μL
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20μL
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豎琴奧斯特線蟲PCR 引物混合液
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各2μL
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2μL
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2μL
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N+2個樣品DNA模板
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各18μL
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PCR 陰性對照（水）
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18μL
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PCR 陽性對照（豎琴奧斯特線蟲PCR陽性對照1000倍稀釋液）
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--
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18μL
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4. 按下表設(shè)置 PCR 反應(yīng)：
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過程
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溫度
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時間
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預(yù)變性
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95℃
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5 min
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PCR 反應(yīng)（35 個循環(huán)）
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95℃
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30 sec
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55℃
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30 sec
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72℃
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40 sec
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延伸
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72℃
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7 min
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三、電泳檢測：
5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物。電泳檢測 PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在 擴增結(jié)束后可以直接上樣，不需要另外再加 loading buffer。PCR 產(chǎn)物陽 性對照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn)，陰性對照必須無任何擴增，否則實 驗無效。對沒有擴增產(chǎn)物的樣品，可以稀釋 10 倍后重復 PCR 擴增以排除 PCR 抑制劑的感染。